转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析
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摘要: 重组克隆DNA用KpnI/BamHI双酶切得到马铃薯Y病毒NIb基因，将其插入质粒pRok2相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒pRok2转化农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404菌株，叶盘法将基因NIb转入烤烟品种NC89的染色体，获得抗卡那霉素的转化再生植株。经抗性筛选、PCR检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定，结果表明，转化烟草植株DNA中整合了外源目的基因，且表现抵抗20μg/mlPVYN的侵染，ELISA分析认为抗性植株无病毒累积，初步筛选出对PVYN侵染具有较高抗性的转基因烟草植株。
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