摘要: 利用多聚酶链式反应(PCR ) 对来源于一种生物杀虫剂(bacu loviru s) 的几丁质酶基因进行体外扩增, 并插入载体质粒pRO K₂ 中, 然后转化大肠杆菌(E scherich ia coli)XL ₁B lue。用重组质粒pRO K₂ DNA 转化植物转基因载体——土壤农杆菌(A g robacteria tum ef aciens) LBA 4404 菌株。借助于土壤农杆菌侵染烟草叶圆片, 将目的基因导入。通过组织培养诱导生芽和生根, 获得烟草再生植株。利用含卡那霉素的培养基对再生烟株进行初步筛选。进一步PCR 和W estern 印迹检测结果表明: 转基因烟草中有几丁质酶基因和蛋白的表达。初步检测结果表明: 转基因烟草具有较高的几丁质酶活性。